EFECTO DE LA CRIOPRESERVACIÓN Y DE LA BLASTOCELECTOMÍA SOBRE EL DESARROLLO in vitro DE EMBRIONES BOVINOS PRODUCIDOS in vivo

Resumen

La criopreservación (CR) es un procedimiento rutinario en biología, ganadería y medicina, y se logra por curva lenta (CL) y vitrificación (VT). La calidad, el estadio de desarrollo y la técnica de CR alteran la viabilidad de los embriones post-descongelados. La blastocelectomía (Blx) se desarrolló para elevar la tasa de sobrevivencia de embriones criopreservados. La hipótesis de este estudio fue que el método de CR por vitrificación versus curva lenta alcanza una mayor tasa de eclosión (TE) in vitro de blastocistos bovinos (BB) con o sin blastocelectomía. El objetivo fue determinar la TE in vitro para BB criopreservados por VT versus CL y con o sin Blx. El diseño experimental fue completamente al azar con arreglo factorial 2?2, y los factores fueron la CR y la Blx. En 30 embriones se realizó Blx y otros 30 embriones quedaron intactos; 50 % de cada grupo se criopreservó por CL y 50 % por VT (n?15, por tratamiento). Los embriones criopreservados por CL fueron expuestos a 1.5 M de etilenglicol por 10 a 30 min y congelados a velocidad de 0.5 °C min?1 en una congeladora automática. La VT se realizó introduciendo los embriones en solución de equilibrio por 5 a 15 min, después se pasaron a cuatro gotas de solución de vitrificación y se mantuvieron 5, 5, 10 y 10 s en cada gota, respectivamente; luego se colocaron en Criotops? y se sumergieron en nitrógeno líquido. Después de descongelar y calentar, los blastocistos se cultivaron en medio IVC3? con 10 % de sustituto sintético de suero por 72 h a 38.5 °C, 5 % de CO2, 5 % de aire y 95 % de humedad. La TE se analizó por el método de ?2 para determinar la homogeneidad entre las proporciones de los tratamientos. El efecto de BLX en la tasa de supervivencia y TE in vitro fue no significativo. VT como método de CR de BB producidos in vivo permite tasa de supervivencia mayor y mejor tasa de eclosión postdescongelación que el método de congelación CL.